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黃曲霉毒素B1 (Ⅰ型)
產(chǎn)品編號(hào): 106258
產(chǎn)品: 黃曲霉毒素B1 (Ⅰ型) 
品牌: 國(guó)產(chǎn)
型號(hào): Array
單價(jià): 面議
供貨總量: 庫(kù)存充足
貨源周期: 現(xiàn)貨
發(fā)貨期限: 自買家付款之日起 3 天內(nèi)發(fā)貨
有效期至: 長(zhǎng)期有效
最后更新: 2020-12-17 13:40
 
詳細(xì)說(shuō)明
 【檢測(cè)步驟】

一、 測(cè)定前須知:

1. 使用之前將所有試劑和所需板條回溫(20~25℃)。

2. 使用之后立即將所有試劑及剩余板條放置2~8℃,干燥環(huán)境保存有利于保持試劑穩(wěn)定性。

3. ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA操作中的要點(diǎn)。

4. 在所有恒溫孵育過(guò)程中,避免光線照射,用蓋板膜封住微孔板。

二、操作步驟:

1. 將所需試劑及微孔板取出,放置室溫(20~25℃)30min以上,液體試劑使用前均須搖勻。

2. 取出所需數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板與干燥劑一起重新真空密封,放置于2~8℃。不可冷凍。

3. 洗滌工作液在使用前也需回溫。

4. 將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

5. 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50μl到對(duì)應(yīng)的微孔中,加入酶標(biāo)物50μl/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光反應(yīng)15min。

6. 小心揭開(kāi)蓋板膜,用洗滌工作液充分洗滌,300μl/孔,洗板5次,每次間隔30s,用吸水紙拍干。

7. 加入顯色液100μl/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置室溫避光反應(yīng)15min。

8. 加終止液50μl/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)酶標(biāo)儀于450nm處讀取每孔OD值。

【結(jié)果判定】

1. 百分吸光率的計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以100%,即

百分吸光率(%)= B/ B0×100%

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

B0—0(ppb)標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉毒素B1實(shí)際含量。

【注意事項(xiàng)】

1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有恢復(fù)到室溫(20~25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

2. 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3. 每種試劑使用前均需搖勻。

4. 反應(yīng)終止液為0.5M的硫酸,避免接觸皮膚。

5. 不要使用過(guò)了有效期的試劑盒;也不要摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。

6. 儲(chǔ)存條件:

試劑盒保存于2~8℃,不能冷凍,將不用的微孔板重新真空密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的顯色劑對(duì)光敏感,因此要避光保存。

7. 試劑變質(zhì)的跡象:

顯色試劑有任何顏色表明顯色劑變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。

8. 加入顯色液后,一般顯色時(shí)間為15~30min。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到35min(或更長(zhǎng)),但不得超過(guò)40min。反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。

9. 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

【樣品最低檢測(cè)限】

    谷物 …………………………………………………0.8ppb

    蛋糕 ……………………………………………………1ppb

    花生、奶油蛋糕 ……………………………………1ppb

    食用油 …………………………………………………1ppb

    飼料、面粉、湯圓 ………………………………2.4ppb

    啤酒 …………………………………………………0.5ppb

    醬油、醋……………………………………………0.8ppb

【貯藏條件及保存期】

貯藏條件:保存試劑盒于2~8℃。

保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。

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