4.2.2.1 單光束分光光度計
其光路示意圖如圖4.7所示,經單色器分光后的一束平行光,輪流通過參比溶液和樣品溶液,以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結構簡單、操作方便、維修容易,適用于常規分析。國產722型、751型、島津UVmini-1240型等均屬于此類分光光度計。
4.2.2.2 雙光束分光光度計
其光路示意圖如圖4.10所示,光源發出的光經單色器分光后,經反射鏡(M1)分解為強度相等的兩束光,一束通過參比池,另一束通過樣品池,光度計能自動比較兩束光的強度,此比值即為試樣的透光率,經對數變換將其轉換為吸光度,并作為波長的函數光度計記錄下來。雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品池,因而能自動消除光源強度變化所引起的誤差。這類儀器有北分瑞利UV-2200型、北京普析通用UV-1901型、島津UV-1800型等。
圖4.10 單波長雙光束分光光度計原理圖
M1、M2、M3、M4—反射鏡
4.2.2.3 雙波長分光光度計
其基本光路示意圖如圖4.11所示,由同一光源發出的光被分成兩束,分別經過兩個單色器,得到兩束不同波長(λ1和λ2)的單色光,利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池,然后經過光電倍增管和電子控制系統,最后由顯示器顯示出兩個波長處的吸光度差值ΔA(ΔA=Aλ1-Aλ2)。對于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)分析,以及存在背景干擾或共存組分高精度COD多參數分析測定儀吸收干擾的情況下,利用雙波長分光光度法往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計,能獲得導數光譜。通過光學系統轉換,使雙波長分光光度計很方便地轉化為單波長工作方式。如果能在λ1和λ2處分別記錄吸光度隨時間變化的曲線,還能進行化學反應動力學研究。此類光度計有國產WFZ800-s型和島津UV-1780型等。
圖4.11 雙波長分光光度計光路示意圖
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