病毒粒子易降解，在提純時需要加入還原劑（O.O1mol/L.Na2S03）。提純病毒應(yīng)在4℃條件下進行，產(chǎn)量約為每100g來自黃花煙草Nicotiana.rustica的病葉材料可以獲得100～1000mg病毒。從系統(tǒng)侵染的黃花煙草采集病葉，每克葉片加入3mL提取緩沖液（0.01mol/L亞硫酸鈉，0.1mol/L硫酸鈉，pH7.0）研磨。研磨可以在勻漿機中進行，采用中速，點動5～10次。勻漿的組織用紗布過濾，然后在10OOOr/min下離心15min。取沉淀物并溶于用量為每克葉片組織加入1mL的緩沖液中（0.01mol/L亞硫酸鈉；0.01mol/L磷酸鈉，pH7.0），在磁力攪拌器中緩緩勻漿30min。在8000r/min離心15min，收集上清液，并在100OOOr/min離心30min。沉淀物以每克葉片組織加入5mL緩沖液，并取出2.5mL在10%～40%的蔗糖梯度中分層（70OOOr/min下離心45min-BECkman.SW28離心機），乳白色帶中即為病毒粒子。收集病毒粒子，并以1∶1比例再溶于緩沖液中，在100OOOr/min離心1h。含有病毒粒子的沉淀物溶于無菌重蒸水中，濃度調(diào)至10mg/mL。產(chǎn)物立即使用或在-80℃下保存。詳細參見Van.den.Hurk，J.，Tas，P.W便攜式防水溶解氧測定儀.L.and.Peters，D.J.Gen.Virol.1977，36：81。