1.        打開電腦主機電源。

2.        打開F4500主機電源。間隔10秒后，按下氘燈開關按鍵（不得超過5秒），當黃燈亮起不熄滅時，打開主板電源。

3.        點擊FL solutions圖標，打開儀器工作程序窗口。

4.        將待測溶液倒入熒光比色皿，用柔軟的濾紙（最好為擦鏡紙）拭去熒光比色皿外側溶液，打開儀器蓋，將熒光比色皿放入儀器中的專用位置，蓋好蓋子。

5.        點擊“方法”圖標。在打開的框圖中，點擊“一般” 圖標，選擇“波長掃描”方式；點擊“儀器”圖標，選擇掃描方式為“發射”，固定激發波長為某一整數值X，發射掃描開始波長為“X + 20”nm，發射掃描結束波長為“2X－20”nm，但發射掃描結束波長最大不超過900nm。

6.        點擊“測量”圖標，開始進行發射光譜掃描。儀器結束掃描后自動給出相應的測量參數和最大發射波長及對應的熒光強度。

7.        點擊“方法”圖標。在打開的框圖中，點擊“儀器”圖標，選擇掃描方式為“激發”，發射波長選擇剛才所得的最大發射波長數值Y，激發掃描開始波長為“1/2Y + 20”nm，激發掃描結束波長為“Y－20”nm。

8.        點擊“測量”圖標，開始進行激發光譜掃描。儀器結束掃描后自動給出相應的測量參數和最大激發波長及對應的熒光強度。

9.        將激發波長設為“八、”確定的數值。重復“五、”至“八、”的步驟。直至獲得的激發波長和發射波長的數值不再明顯改變為止。

10.    點擊“方法”圖標，在打開的框圖中，點擊“一般” 圖標，選擇“光度計”方式，選擇“使用樣品表”；點擊“定量”圖標，“定量”為波長，“校正曲線”為1級，“濃度”為mg/L，“小數點后位數”為1；點擊“儀器”圖標，在Ex 和Em項填寫獲得的最佳激發波長和發射波長數值，“重復”為3，“波長”為兩者波長固定；點擊“標準”圖標，“樣品數”為6，欄中分別輸入相應溶液的濃度。點擊“確定”。

11.    點擊“樣品”圖標，選擇測定的樣品數目，點擊“確定”。

12.    將待測溶液裝入熒光比色皿，放入儀器熒光架。點擊“測量”，按提示逐步操作。記錄測量樣品溶液的熒光強度、濃度、回歸方程、相關系數及樣品溶液濃度。計算含量。

13.    工作結束后，清洗熒光比色皿，關閉儀器工作程序窗口。

14.    順序關閉主板電源、主機電源。