(一)亞硝酸鹽測(cè)定
2 原理
樣品經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后,在弱酸條件下亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化后,再與N-1-萘基乙二胺偶合形成紫紅色染料,與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。
3 試劑
實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水,試劑不加說明者,均為分析純?cè)噭?br style="content: ""; display: block; width: 700px; height: 0px; margin: 20px 0px;" /> 3.1 氯化銨緩沖液:1L容量瓶中加入500mL水,準(zhǔn)確加入20.0mL鹽酸,振蕩混勻,準(zhǔn)確加入50mL氫氧化氨,用水稀釋至刻度。必要時(shí)用稀鹽酸和稀氫氧化銨調(diào)試至pH9.6~9.7。
3.2 硫酸鋅溶液(0.42mol/L):稱取120g硫酸鋅(ZnSO4·7H2O),用水溶解,并稀釋至1000mL。
3.3 氫氧化鈉溶液(20g/L):稱取20g氫氧化鈉用水溶解,稀釋至1L。
3.4 對(duì)氨基苯磺酸溶液:稱取10g對(duì)氨基苯磺酸,溶于700mL水和300mL冰乙酸中,置棕色瓶中混勻,室溫保存。
3.5 N-1-萘基乙二胺溶液(1g/L):稱取0.1gN-1-萘基乙二胺,加60%乙酸溶解并稀釋至100mL,混勻后,置棕色瓶中,在冰箱中保存,一周內(nèi)穩(wěn)定。
3.6 顯色劑:臨用前將N-1-萘基乙二胺溶液(1g/L)和對(duì)氨基苯磺酸溶液等體積混合。
3.7 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液:準(zhǔn)確稱取250.0mg于硅膠干燥器中干燥24h的亞硝酸鈉,加水溶解移入500mL容量瓶中,加100mL氯化銨緩沖液,加水稀釋至刻度,混勻,在4℃避光保存。此溶液每毫升相當(dāng)于500μg的亞硝酸鈉。
3.8 亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液:臨用前,吸取亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mL,置于100mL容量瓶中,加水稀釋至刻度,此溶液每毫升相當(dāng)于5.0μg亞硝酸鈉。