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霉菌和酵母菌廣泛存在于空氣、水和土壤中，絕大部分對人體無害，但有些霉菌對人體有害，如黃曲霉，它分泌的黃曲霉毒素是一種強(qiáng)致癌物。霉菌還可引起食物霉變，會刺激人體消化道、胃部等，嚴(yán)重的還可損傷肝臟，造成食物中毒。霉菌酵母菌檢測板由營養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑等組成。與傳統(tǒng)方法相比，省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以開始進(jìn)行抽樣檢測，而且操作簡便，通過酶顯色劑的放大作用，使菌落提前清晰地顯現(xiàn)出來，培養(yǎng)時間由一周縮短為48h，本品可用于各類食品及飲用水中霉菌和酵母菌的計數(shù)，非常適合于食品衛(wèi)生檢驗部門和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 微生物學(xué)檢驗 霉菌和酵母計數(shù)》（GB 4789.15）
2、操作方法
2.1 樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL無菌水的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi)，充分搖勻，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL無菌水的試管內(nèi)，反復(fù)吸吹50次成為1:100的樣品勻液，以此類推，根據(jù)對樣品污染狀況的估計，選擇樣品勻液的稀釋度，每次換一支吸管。
2.2 接種：一般食品選2～3個稀釋度進(jìn)行檢測，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測。將霉菌酵母菌檢測板置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液滴加到檢測板內(nèi)，迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板，使樣品稀釋液均勻吸附在濾紙上，靜置10 s左右，待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩片，做好空白陰性對照。
2.3 培養(yǎng)：將檢測板疊在一起，倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。29℃±1℃，培養(yǎng)48～72 h。
3、結(jié)果判讀
霉菌和酵母菌在檢測板上生長后會顯示藍(lán)色斑點，霉菌菌落顯示的斑點略大呈放射狀，酵母菌落則較小而圓滑，許多霉菌在培養(yǎng)后期會呈現(xiàn)其本身特有的顏色。選擇菌落數(shù)適中（10～150CFU）的檢測板進(jìn)行計數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升（克）樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。
霉菌和酵母菌廣泛存在于空氣、水和土壤中，絕大部分對人體無害，但有些霉菌對人體有害，如黃曲霉，它分泌的黃曲霉毒素是一種強(qiáng)致癌物。霉菌還可引起食物霉變，會刺激人體消化道、胃部等，嚴(yán)重的還可損傷肝臟，造成食物中毒。霉菌酵母菌檢測板由營養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑等組成。與傳統(tǒng)方法相比，省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以開始進(jìn)行抽樣檢測，而且操作簡便，通過酶顯色劑的放大作用，使菌落提前清晰地顯現(xiàn)出來，培養(yǎng)時間由一周縮短為48h，本品可用于各類食品及飲用水中霉菌和酵母菌的計數(shù)，非常適合于食品衛(wèi)生檢驗部門和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)：《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 微生物學(xué)檢驗 霉菌和酵母計數(shù)》（GB 4789.15）
2、操作方法
2.1 樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL無菌水的取樣罐或均質(zhì)袋內(nèi)，充分搖勻，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL，注入含有9mL無菌水的試管內(nèi)，反復(fù)吸吹50次成為1:100的樣品勻液，以此類推，根據(jù)對樣品污染狀況的估計，選擇樣品勻液的稀釋度，每次換一支吸管。
2.2 接種：一般食品選2～3個稀釋度進(jìn)行檢測，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測。將霉菌酵母菌檢測板置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液滴加到檢測板內(nèi)，迅速貼好上層膜并水平晃動檢測板，使樣品稀釋液均勻吸附在濾紙上，靜置10 s左右，待樣品勻液完全被吸附在濾紙上。每個稀釋度接種兩片，做好空白陰性對照。
2.3 培養(yǎng)：將檢測板疊在一起，倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。29℃±1℃，培養(yǎng)48～72 h。
3、結(jié)果判讀
霉菌和酵母菌在檢測板上生長后會顯示藍(lán)色斑點，霉菌菌落顯示的斑點略大呈放射狀，酵母菌落則較小而圓滑，許多霉菌在培養(yǎng)后期會呈現(xiàn)其本身特有的顏色。選擇菌落數(shù)適中（10～150CFU）的檢測板進(jìn)行計數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升（克）樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。
4、計數(shù)原則及報告方式
4.1通常選擇菌落在10～150CFU之間的檢測板進(jìn)行計數(shù)，取平均值乘以稀釋倍數(shù)報告之（見例1）。
4.2若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于150 CFU，則對稀釋度最高的檢測板進(jìn)行計數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)報告之，其他檢測板可記錄為多不可計（見例2）。
4.3若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于10 CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（見例3）。
4.4 若所有的稀釋度（包括液體樣品原液）均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告之（見例4）。
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例次 |
稀釋度及菌落數(shù) |
菌落總數(shù)/ (CFU/g或CFU/mL） |
報告方式 （CFU/g或CFU/mL） |
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10-1 |
10-2 |
10-3 |
|||
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1 2 3 4 |
158 多不可計 8 0 |
76 352 5 0 |
5 169 1 0 |
7600 169000 80 ＜1×10 |
7.6×10 3 1.7×10 5 8.0×10 ＜10 |
5、附加說明
5.1 由于霉菌常以孢子的形式于空氣中到處傳播，而多種樣品是要求霉菌酵母菌不得檢出，因此檢測霉菌時需特別小心操作，取樣用品、稀釋用水和吸管吸頭等都需仔細(xì)消毒，接種時盡量避免空氣流動，動作要干凈利落，每次最好用無菌水接種兩片空白對照，以免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
5.2 注意使用過的檢測板上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。