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10月3日消息,據上海臻科午間發(fā)表:小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫分析試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
二、小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫分析試劑盒產品優(yōu)勢
1、優(yōu)點明顯 產品具有靈敏度高、特異性強的特點,具有穩(wěn)定的重復性,吸附性能好,空白值低,并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測,方法簡單,操作方便,限度的節(jié)省了實驗經費。
2、品質保障 產品保證質量,出庫質檢把控嚴格,保障提供給客戶的100%是優(yōu)質產品,運輸全程跟蹤,公司承諾有任何質量問題包退換,誠信經營,合作共贏。
3、專業(yè)定制 應市場需求公司特推出專業(yè)定制ELISA試劑盒服務,全程有專業(yè)的技術老師跟蹤并和客戶保持溝通,直到定制成功為止。
4、免費代測 公司承諾訂購ELISA試劑盒,享全程技術指導并可免費代測,為您分憂。全程有專業(yè)技術老師負責代測,收到樣本一般7個工作日出結果。
5、服務周到 設立售后服務中心,24小時及時響應,真正做到后顧無憂,不斷完善服務體系。
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/font>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
四、小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫分析試劑盒操作流程
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
五、小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫分析試劑盒注意事項
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
2.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。